留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码
x

肺癌肿瘤标志物神经元特异性烯醇化酶抗原适配子的筛选及其应用

赵运旺 朱家宁

赵运旺, 朱家宁. 肺癌肿瘤标志物神经元特异性烯醇化酶抗原适配子的筛选及其应用[J]. 分子影像学杂志, 2017, 40(1): 112-115. doi: 10.3969/j.issn.1674-4500.2017.01.33
引用本文: 赵运旺, 朱家宁. 肺癌肿瘤标志物神经元特异性烯醇化酶抗原适配子的筛选及其应用[J]. 分子影像学杂志, 2017, 40(1): 112-115. doi: 10.3969/j.issn.1674-4500.2017.01.33
Yunwang ZHAO, Jianing ZHU. An aptamer-based analytical method for rapid detection of lung cancer tumor markers NSE antigen[J]. Journal of Molecular Imaging, 2017, 40(1): 112-115. doi: 10.3969/j.issn.1674-4500.2017.01.33
Citation: Yunwang ZHAO, Jianing ZHU. An aptamer-based analytical method for rapid detection of lung cancer tumor markers NSE antigen[J]. Journal of Molecular Imaging, 2017, 40(1): 112-115. doi: 10.3969/j.issn.1674-4500.2017.01.33

肺癌肿瘤标志物神经元特异性烯醇化酶抗原适配子的筛选及其应用

doi: 10.3969/j.issn.1674-4500.2017.01.33
基金项目: 

国家自然科学基金 81360333

详细信息
    作者简介:

    赵运旺,硕士,E-mail: 1021357025@qq.com

An aptamer-based analytical method for rapid detection of lung cancer tumor markers NSE antigen

  • 摘要: 目的提出一种基于适配子快速检测肺癌肿瘤标志物的方法。 方法利用指数级富集配体的系统进化技术筛选其高特异性适配子,通过流式细胞术检测亲和力,最终选出一条高亲和力、强特异性的适配子。枸橼酸钠还原法制备纳米金颗粒。建立基于免标记纳米金和适配子的分析方法,并对其方法进行考察。 结果通过 6 轮筛选得到三条 NSE 的高特异性、强亲和力的适配子,其中,a 适配子特异性最高。同时利用筛选得到的肺癌肿瘤标志物 a 适配子和纳米金颗粒建立一种快速检测 NSE 抗原的方法。 结论该方法具有较好的准确度,为肺癌的早期检测提供了一种新的手段。

     

  • 图  1  SELEX技术筛选流程

    图  2  适配子亲和力检测结果

    图  3  适配子二级结构预测

    图  4  流式细胞术检测a适配子与肺癌血清、正常人血清的结合

    图  5  适配子浓度对数与吸光值之间的关系

    表  1  适配子测序序列

    序列号 大小(bp) 序列 Kd ( mmol/L)
    a 30 CGGTAATACGGTTATCCACAGAATCAGGGG 21±8
    b 29 CAAAAGGCCAGGAACCGTAAAAAGGCCGC 30±5
    c 30 TAAAGATACCAGGCGTTTCCCCCTGGAAGC 33±4
    下载: 导出CSV
  • [1] Cai D, Xu D, Zhang Q, et al. Classification of lung cancer using ensemble-based feature selection and machine learning methods[J]. Molecular biolystems, 2014, 464(7291): 1071-6. http://cn.bing.com/academic/profile?id=49fee408729c733e13f837e4fc1d38b7&encoded=0&v=paper_preview&mkt=zh-cn
    [2] 杜淑英. 血清5种肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的价值[J]. 北方药学, 2014, 11(9): 85-6. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-BFYX201409073.htm
    [3] 时广利, 胡秀玲, 岳思东, 等. 血清肿瘤标志物在肺癌辅助诊断中的应用[J]. 中华肿瘤杂志, 2005, 27(5): 299-301. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZHZL200505014.htm
    [4] Mckeague M, Mcconnell EM, Cruztoledo TJ, et al. Analysis of in vitro aptamer selection parameters[J]. J Mole Evol, 2015,81(5):150-61. http://cn.bing.com/academic/profile?id=cde2fce0e2162906faf59b21657e4d47&encoded=0&v=paper_preview&mkt=zh-cn
    [5] Liu K, Lin B, Lan X. Aptamers: a promising tool for cancer imaging, diagnosis, and therapy[. J]. J Cell Biochem, 2013, 114(2): 250-5. doi: 10.1002/jcb.v114.2
    [6] Darmostuk M, Rimpelová S, Gbelcova H, et al. Current approaches in SELEX: An update to aptamer selection technology.[J]. Biotechnol Adv, 2015, 33(6): 1141-61. doi: 10.1016/j.biotechadv.2015.02.008
    [7] Chen X, Zhang J, Nilsen HM. Fe-g-C3N4-Catalyzed oxidation of benzene to phenol using hydrogen peroxide and visible light[J]. J Am Chem Soc, 2009, 131(33): 12018-24. http://cn.bing.com/academic/profile?id=f291bdceaf085dc88a6cdece58616676&encoded=0&v=paper_preview&mkt=zh-cn
    [8] 陈伶利, 李杰, 张晓青, 等. 以大肠埃希菌tolC蛋白为靶标的适配体的筛选及结构分析[J]. 北京大学学报: 医学版, 2014, 46(5): 698-702. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-BYDB201405006.htm
    [9] Fletcher J, Phillips W, Milligan S, et al. Toward specific detection of dengue virus serotypes using a novel modular biosensor[J]. Biosens Bioelectron, 2010, 26(4): 1696-700. doi: 10.1016/j.bios.2010.07.046
    [10] Biroccio A, Hamm J, Incitti I, et al. Selection of RNA aptamers that are specific and high-affinity ligands of the hepatitis C virus RNA-dependent RNA polymerase[J]. J Virol, 2002, 76(8): 3688-96. doi: 10.1128/JVI.76.8.3688-3696.2002
    [11] Zhou J, Shu Y, Guo P, et al. Dual functional RNA nanoparticles-gp120 aptamer for cell-type specific delivery and HIV-1 inhibition[J]. Mrthods, 2011, 54(2): 284-94.
    [12] Wheeler A, Trifonova R, Vrbanac V, et al. Inhibition of HIV transmission in human cervicovaginal explants and humanized mice using CD4 aptamer-siRNA chimeras[J]. J Clin Invest, 2011,121(6): 2401-12. doi: 10.1172/JCI45876
    [13] Tuerk C, Gold L. Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: RNA ligands to bacteriophage T4 DNA polymerase[J]. Science, 1990, 249(4968): 505-10. doi: 10.1126/science.2200121
    [14] Fang XH, Sen A, Vicens M, et al. Synthetic DNA aptamers to detect protein molecular variants in a high-throughput fluorescence quenching assay[J]. Chembiochem, 2003, 4(9): 829-34. doi: 10.1002/cbic.v4:9
    [15] Jeon H, Kayhan B, Ben YT, et al. A DNA aptamer prevents influenza infection by blocking the receptor binding region of the viral hemagglutinin[J]. J Biol Chem, 2004, 279(46): 48410-9. doi: 10.1074/jbc.M409059200
    [16] Misono S, Kumar K. Selection of RNA aptamers against human influenza virus hemagglutinin using surface plasmon resonance[J]. Anal Biochem, 2005, 342(2): 312-7. doi: 10.1016/j.ab.2005.04.013
    [17] Gopinath C, Misono S, Kawasaki K, et al. An RNA aptamer that distinguishes between closely related human influenza viruses and inhibits haemagglutinin-mediated membrane fusion[J]. J Gen Virol,2006, 87(Pt 3): 479-87. http://cn.bing.com/academic/profile?id=72070702d4e4646526b119406a48a96c&encoded=0&v=paper_preview&mkt=zh-cn
  • 加载中
图(5) / 表(1)
计量
  • 文章访问数:  686
  • HTML全文浏览量:  550
  • PDF下载量:  2
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  2016-09-13
  • 刊出日期:  2017-01-01

目录

    /

    返回文章
    返回

    关于《分子影像学杂志》变更刊期通知

    各位专家、作者、读者:

    为了缩短出版时滞,促进科研成果的快速传播,我刊自2024年1月起,刊期由双月刊变更为月刊。本刊主要栏目有:基础研究、临床研究、技术方法、综述等。

    感谢各位专家、作者、读者长期以来对我刊的支持与厚爱!

    南方医科大学学报编辑部

    《分子影像学杂志》

    2023年12月27日